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单细胞悬液制备方法对其细胞组织的流式制备
技术文章 2021-02-23 17:53

  流式细胞术对细胞组织的各种参数分析是依据于单细胞,依据不一样实体组织成分的特性能够挑选出不一样的分散细胞方法,以达到对单细胞产量高、细胞损害小的目的。


  单细胞制备的机械或人工操作的可能会在一定程度上改变原有组织细胞的某些特性,所以,在处理不同细胞组织时,应尽量探索方法。单细胞悬液制备方法的应用可对细胞损伤小、产率高,且其还能较大程度的保留其细胞的原有特性。

  流式细胞术

 实体组织单细胞悬液制备的机械法操作:


  应用刀片切割粉碎细胞组织,用均浆机将其均匀打浆,用线注射针反复抽取细胞等,然后应用300目尼龙网过滤细胞将获得制备后的单细胞悬液。


一、网搓法


  1、把100目和300目的尼龙网系在一个小烧杯上


  2、把剪切好的组织碎块放在尼龙网上,用小镊子轻轻的摩擦组织块,并边摩擦边用生理盐水对其进行冲洗,直至组织被摩擦完


  3、吸取收集细胞悬液,以500~800转/分钟的速度对其细胞组织进行离心沉淀几分钟


  4、离心结束后,将其细胞固定或低温进行储存


二、剪切法


  1、把组织块放在平皿里,在加少量的生理盐水。


  2、将其组织剪切成均匀的浆状,在其内添加10ml的盐水。


  3、用吸管吸取组织均匀的浆液,要先用100目的尼龙网将其过滤到试管中。


  4、以1000转/分钟离心沉淀几分钟,然后用生理盐水洗涤3次,每次以500~800转/分钟的低速短时间离心沉淀,去除细胞碎片。


  5、选用300目的尼龙网对细胞进行过滤去除。


  6、选择合适的固定液或百分之70的冰乙醇等都可,将其细胞固定或低温储存以备后用。


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