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微流控Drop-seq单细胞测序技术
技术文章 2023-05-16

  高通量液滴微流控Drop-seq单细胞测序技术是一种可快速分析数千个单细胞的实验方法,通过对细胞包裹在微滴中的操作,可进行RNA杂交,且生成mRNA转录物,对其制作细胞基因表达谱,可进一步分析mRNA转录物的起源细胞。


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  微流控Drop-seq也是一种单细胞RNA测序技术,通过在微滴中去捕获单细胞并扩增RNA来获取生物细胞的转录组数据。生物细胞可通过微滴分离可分解细胞,在微滴中加入反转录酶和barcodebeads珠,且这类珠子可以被反转录酶转录为RNA,可在RNA末端加入一个序列,从而标记每一个RNA分子及其细胞来源;通过PCR扩增这些标记的RNA分子,可将其构建成一个文库,可对其进行高通量测序,从而可获得单细胞的转录组数据。

  

  通过微流控技术,可将捕获RNA的微珠和单细胞同时包裹在液滴中,然后在液滴中可完成细胞MRNA的富集,然后合并微珠,可完成生物细胞的建库并测序;基于微流控液滴的单细胞测序可在短时间内同时批量处理更多生物细胞,但由于微珠捕获MRNA的限制,该方法可在获得细胞数量的同时测到减少的基因数。


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  Drop-seq技术与其他的细胞测序技术相比,它可以在细胞数量有限的状态下实现单细胞RNA测序,且具有高通量、高灵敏度和高特异性等性能应用特点,被广泛应用于单细胞转录组学研究;微流控Drop-seq单细胞测序技术在神经科学、发育生物学、肿瘤学等多个行业研究领域也得到了广泛的应用。


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