外周背根神经节(DRG)神经组织细胞脆弱、组织结构致密,解离过程易损伤细胞,获得数量充足、状态良好的单细胞悬液颇具挑战。为提升DRG样本的消化效率与细胞得率,用户选用上海净信单细胞悬液制备仪4通道JX-CKSM-WK4,搭配专用DRG神经解离酶(A酶+B酶两步消化),对小鼠背部外周DRG神经开展单细胞悬液制备。

单细胞悬液制备仪对小鼠组织样品前处理制备的实验步骤:
1、仪器准备:上海净信单细胞悬液制备仪4通道JX-CKSM-WK4、drg神经解离酶(两种酶A酶和B酶)、仪器配套的研磨管和过滤管
2、样品准备:小鼠背部外周drg神经
3、操作步骤:先将A酶和B酶放在37度预热,再样本处理,将取出的神经先放在PBS溶液中,然后将待所有5条神经取出完毕,然后转移至研磨管中,加入消化酶A,盖上盖子;选择对应的程序,进行第一步预消化,结束后将氧化锆磁珠取出,涡旋仪瞬离后将上清液加入放入B酶的研磨管后,再选择对应程序运行
4、样品观察:运行结束,取出观察组织块已经几乎消化成浑浊的细胞悬液,用滤网过滤细胞,加入终止液终止消化、离心,取出弃上清,可明显看到沉于底部的单细胞,重悬后,显微镜观察
实验注意事项:
1. 实验前一定主要要将酶放在37度环境预消化
2. 注意不要清洗单细胞悬液次数或时间太长,导致细胞损失
单细胞悬液制备仪对样品细胞悬液制备的实验结果:

第一步程序结束后样品情况

结束后显微镜观察图片
与客户合作成果,组织消化效果较好,细胞量足,满足客户实验所需
通过实验表明,上海净信JX-CKSM-WK4单细胞悬液制备仪配合A、B两步酶解程序,可充分消化DRG神经组织,经终止、离心后可见明显细胞沉淀,重悬镜检细胞状态良好,细胞量充足,满足客户后续实验需求。整个流程程序化、可控性强,配合37℃酶预温与减少洗涤次数等注意事项,有助于获得符合后续实验要求的细胞样本。
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