实验目的:此次实验选用小鼠胰腺作为样品组织,以便在制备小鼠胰腺样品的单细胞悬液后进行单细胞测序分析
实验设备:单细胞悬液制备仪 JX-CKSM-4WK
小鼠胰腺样品前处理悬液制备的实验操作步骤:
1.提前冰浴解冻消化酶和终止液;
2.打开热板加热和模块加热,将设备加热到37℃;
3.小鼠处死后取小鼠胰腺;
4.小鼠胰腺经过DPBS清洗后,用纸擦干,剪成黄豆粒大小;
5.将处理后的小鼠胰腺放入消化管中,加入消化酶,上机静置3min后使用程序2进行消化25分钟;
6.程序结束后取出,使用40μm筛网过滤
7.离心、裂红、重悬;
8.使用细胞计数仪检测细胞活率,活率为81%。
实验操作注意事项:
1.清洗使用没有Ca2+和Mg2+离子的DPBS
2.提前将仪器加热,酶和终止液提前解冻
3.后续做单细胞测序的单细胞悬液过滤需要使用40μm筛网
实验操作图:
样品前处理悬液制备实验效果图:
实验结果信息:
单细胞悬液制备仪是一种集成金属浴消化与温和剪切组织的新一代单细胞细胞悬液制备设备,主要应用于流式细胞术/单细胞测序/原代细胞培养等实验,具有起始组织量小,时间短,细胞得率高,细胞活性高等性能特点。